Eine Reihe von Produkten, die speziell für Immunfluorescenz-Reaktionen entwickelt wurden, mit einer einzigartigen Rezeptur, die die Fluoreszenz von Farbstoffen nicht mehr abnimmt.Die häufig verwendeten Anti-Fluoreszenz-Abbau-Abdecktabletten sindAF1undAF2undAF3undAF4undAF87undAF100undAF200undAF300undCFM-1undCFM-2Warte mal. Einige dieser Produkte enthaltenDAPI,Färbbar Zellkern oder FärbungDie DNADas Experiment.

In Bezug auf die Antifluoreszenz-Löschmittel, die üblichen drei Arten: Phenol-Typ-Phonosäure-Propylestern-Propylgallat (NPG)Amin-Typ Paraphenylaminep-Phenylendiamin (PPD)Amin-Typ1,4-Diazabicyclooktan（DABCO(Triethylendiamin). Die grundlegende Theorie des Fluoreszenzschlusses ist so: Der gewöhnliche gelöste Sauerstoff in den Gewebeschneiden wird in einem einlinienen Sauerstoff beim Anregungszustand verwandelt, ein einliniener Sauerstoff ähnelt den freien Sauerstoffradikalen, dieses Ding ist die Hauptursache des Fluoreszenzschlusses, das Anti-Löschmittel, das wir hinzufügen, reagiert hauptsächlich mit diesem Ursache, um den einlinienen Sauerstoff direkt zu beseitigen. Beachten Sie, dass die Einbeziehung von Antistillmitteln in die Schließtabletten dazu führt, dass die Gesamtfluoreszenz oft in der ersten Phase der Anregung verringert wird, sowie mitDie DNARisiko in Verbindung mit Farbstoffreaktionen. Schauen Sie sich die Vorteile und Nachteile dieser drei Reagenzien an:PPDReagiert mit Farbstoffen (insbesondereCy2Daher müssen solche Farbstoffe nicht enthalten werden.PPDSchließmittel;NPGNicht-giftige, lebende Zellen fluoreszierende Färbung bevorzugt solche Versiegerungsmittel, aberNPGDer Prozess der Apoptose wurde beeinträchtigt, Studenten, die solche Studien durchführen, sollten mehr Aufmerksamkeit schenken und möglichst vermeidenNPGSchließmittel;DABCONicht so.PPDSo wirksam und niedrig giftig, kann es in lebenden Zellen verwendet werden, aber mitNPGEbenso wird der Prozess der Apoptose beeinträchtigt.

Es gibt so viele Kapseln, wie kann man schnell das finden, was man braucht? Die einfache Idee ist:

Erster Schritt: Kondensativ oder nicht? Die Kondensation ist sehr einfach zu speichern und zu nehmen, wobei die Kontraktion des Gewebes während des Kondensationsprozesses und die Kontraktion, die einen Dehydratierungsschritt erfordert, berücksichtigt werden muss. Nicht-Kogulationstyp muss berücksichtigt werden, dass die Flüchtigkeit und die Seitenleckage des Dichtungsmittels, natürlich benötigen Sie eine Abdeckfolie (manchmal benötigen Sie auch Silikon-Dichtungspassen)Spacer), und oft müssen die Abdeckschienen auch versiegelt werden, häufig verwendet Nagellack, Zahnwachs,VALAP (gleiche Mischung aus Vaseline, Lanolin und Paraffin gemischt auf einer Heizplatte 60°C)Auftragen um die Abdeckschiene, Nagellack dauert länger, um zu trocknen, es besteht das Risiko einer Verschmutzung der Linse; Zahnwachs kann bei normaler Temperatur schneller aushärten;VALAP (gleiche Mischung aus Vaseline, Lanolin und Paraffin gemischt auf einer Heizplatte 60°C)Es wird häufig bei der Befestigung lebender Zellen verwendet.

Schritt 2: Benötigen Sie Glycerin (wasserlöslich) oder nicht Glycerin (fettlöslich)? Glycerin kann mit jedem Anteil an Wasser vermischt werden und kann mit Ethanol, aber nicht mit Öl, löslich sein. Wenn man das weiß, ist es viel einfacher zu wählen. Wie sieht Ihr Reaktionssystem aus? Wählen Sie Glycerin (wasserlöslich). Nach strenger Entwässerung wird nicht glycerinbasiert (öllöslich) gewählt.

Der dritte Schritt ist die Brechungsrate der Tabletten. Färbung der Folie mit einer Dichttablette Auswahl der Brechungsrate in1．52bis1．54optimale Transparenz; Nicht gefärbtes Gewebe wird am besten mit einer Dichtung mit einer hohen oder sehr niedrigen Brechungsquote versiegelt, die die Kugelunterschiede beseitigt und ein optimales Bild erzielt.

Einführung der verwendeten Membranformmittel:

PolyethylanolPoly (Vinylalkohol): organisches Polymer, nicht giftig, löslich in Wasser, ein häufig verwendetes Membranbilder. Abhängig von ihrer Polymerität und Alkohollosität werden verschiedene Nummern sortiert, z.B.Mowiol ® 4 bis 88.PVAEs können auch andere Substanzen oder Reaktionen zur modifizierten Behandlung hinzugefügt werden, z.B.Permafix-1Es ist modifiziert.PVA.

Polyethylenpyrrolidon(Polyvinylpyrrolidon)kurzPVPEs ist eine nicht-ionische Polymerverbindung und ein häufig verwendetes Filmbildungsmittel.

Produktauswahl:

l AF1:Grundbestandteil ist Glycerin,PBSPuffer, Antifluoreszenzlöschmittel, andere Komponenten usw., Brechungsgrad1.46，PH10Links und rechts, geeignet für die Erkennung von Gewebeschneiden, toten Zellen, die in Glycerin eingetaucht sind, FISCH (einschließlich CARD-FISH)Das Cover warten.

l AF2:Die Grundbestandteile sind Glycerin, Antifluoreszenzlöschmittel, andere Komponenten usw., ohne eigene Puffer. Brechungsrate1.47Der Vorteil dieses Produkts besteht darin, dass es keinen eigenen Puffer gibt, der mit jedem anderen Puffer kompatibel ist.

l AF3:Die Grundbestandteile sindPBSPuffer, Antifluoreszenzlöschmittel, andere Komponenten, Brechungsgrad1.34Besonders geeignet für den Test lebender Zellen.

l AFR3:Die Grundbestandteile sindPBSPuffer, ein neuestes Antifluoreszenzlöschmittel (nicht-Aminophenol), andere Komponenten usw.

l AF4:Auch bekanntMontagemedium Glycerol/n-PropylgallatSchließmittel, das Anti-Fluorescenz-Reduzierungsmittel hinzugefügt wird, ist keine Phonosäure Propylestern-Propylgallat (NPG).

l AF87: Besondere Stellen enthalten keine fluoreszierenden Einweichungsöle, die speziell für die Beobachtung unter hohen Vergrößerungsspiegeln konzipiert sind, fürDAPIFärbung ist besonders nützlichDAPIEs gibt eine Tendenz zur Evakuierung in Glycerin-Fülltabletten).

l AF100:Die Grundbestandteile sindPBSPuffer, Antifluoreszenzmittel, andere Inhaltsstoffe usw., Dies ist ein Glycerin-freies Dichtungsmittel, das mitCFPVOHAnwendung der Lösung. Vorgemischt werden mussAF100undCFPVOHLösung, mit wie viel zu mischen, nach dem Mischen10Innerhalb einer Stunde fertig. Brechungsgrad der Tablette1.34-1.35.

l AF200:undAF100Ähnlich, anders,AF200Es ist Glycerin.,Aminotypisches Antifluoreszenzmittel, geeignet für Verpackungen wie Anthocyanin, Alexa, Hoeches und andere.

l AF300:undAF100Ähnlich, anders,AF300Es ist ein glycerinbasiertes, phenolbasiertes Antifluoreszenzmittel.

l CFMDie Brechungsrate der Serie von Dichtungsmitteln ist1.52Der Brechungsgrad des verwendeten Träger- und Abdeckglases ist gleich oder ungefähr gleich, was sehr hilfreich ist, um ein perfektes Bild zu erhalten. Wird hauptsächlich unter dem Laser-Kofokussmikroskop verwendet oder als Ersatz für das Eintauchen von Öl in Fällen, in denen ein Hochglas eingetaucht werden muss.CFM-1derpH-Wertungefähr6.5，.CFM-1 Plus AntifadentderPH-WertWert ungefähr10，CFM-2derpH vonungefähr~8.5，CFM-3derPH-WertWert nahe neutral.

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